茶皂素对对虾及沙蚕的毒性影响
Ⅰ.茶皂素对对虾及沙蚕的毒性影响
朱全芬1 夏春华1 朱伯荣1 梁亚全2 孙修涛2 唐丽萍1
(1中国农业科学院茶叶研究所,杭州)
(2中国水产科学研究院黄海水产研究所,青岛)
摘 要
有害鱼类的危害,是影响人工养殖对虾产量的主要因数。为寻找一种专门供我国水产养殖的定型“清池剂” ，特对茶皂素的鱼毒活性举行了研究。试验效果批注 ，对虾对茶皂素具有较高的耐受力 ，在不加人为充气的自然条件下 ，茶皂素的使用清静浓度>10ppm ；茶皂素对对虾的饵料生物——沙蚕具有一定的毒性 ，其致死浓度>3ppm。在海水中 ，茶皂素的鱼毒活性约在2天内会自行降解至无效。
要害词：茶皂素 鱼毒活性 虾池 对虾 清池剂
前 言
我国对虾人工养殖始于1978年 ，生长很快 ，至1988年养殖面积已达240万亩 ，对虾总产量为19.9万吨 ，居天下人工养殖对虾的首位。在对虾养殖中 ，常遇到虾池内以及换水时带入的鱼类的危害 ，从而严重影响对虾的产量。为扫除鱼害 ，以往多接纳鱼藤粉作为对虾养殖的清池剂 ，亦有用漂白粉 ，甚至尚有用农药的 ，问题不少。值得提出的是 ，这些药剂只能用于养殖前而不可用于养殖历程中的清池。到现在为止 ，我国还没有一种专门供水产养殖用的定型的“清池剂” ，因此 ，寻找一种较量理想的清池剂已是当务之急。
茶皂素不但具有外貌活性 ，并且还具有心理活性 ，鱼毒活性就是其一。山田等曾以鳉鱼为质料 ，对茶皂素的鱼毒活性举行了研究 ，证实茶皂素对冷血动物有毒 ，其毒性与溶血性有关 ，茶皂素与山茶皂素的溶血指数均为100000。茶籽饼粕在我国有着富厚的资源 ，很有开发前途 ，因此 ，笔者对茶皂素的清池作用的有关基础和应用手艺问题举行了研究。本文报道了茶皂素对对虾极其饵料生物——沙蚕的毒性试验效果。
质料与要领
（一） 质料
供试茶皂素：接纳脱脂茶籽饼粕 ，经提取、疏散和干燥 ，制成含量>60%的粉剂。凭证使用要求 ，配制成茶皂素Ⅰ和茶皂素Ⅱ二种型号的清池剂 ，供试验筛选用。
供试对虾（Penaeus Orientalis Kishinoye）（仔虾）由黄海水产研究所养殖室提供 ，平均体长2.7厘米（1.9—4.7厘米） ；沙蚕（Neanthes diversicolor）捞自胶州湾潮间带淤泥中 ；供试纹缟鰕虎鱼（Tridentiger trigonocephalus G11）捞自胶州湾潮间带 ，平均体长3.2厘米（1.6—7.9厘米）。
（二） 要领
试验在青岛市黄海水产研究所太平角养殖室举行。对虾接纳水产专用的直径48厘米、高50厘米的环氧树酯桶饲养。总溶液70升 ，每个实验组10尾。水源用经由滤盐度为比重1.021（25℃）即29.66‰的海水 ，PH8.0—8.2 ，水质澄清透明 ，水温24—27℃。饲养历程以鲜蛤落肉或干虾皮作饵料 ，天天喂2次。饲养方法设10尾合养和单养两种。后者主要为阻止虾间蚕食和误伤。单养的要领是：用直径约1米的环氧树酯管制成小罐 ，上下用尼龙网封口 ，上封口是活动的 ，可以放虾、喂料 ，10个罐放入一个大桶中。
试验分两部分：第一部分设0、5、10、20、40、60和80ppm7个浓度处置惩罚接纳第1种饲养方法视察两种型号茶皂素对对虾的毒性 ，同时举行充气与不充气较量。第2部分为80、100和120ppm浓度较量 ，接纳第2种饲养方法 ，相识茶皂素对对虾全致死浓度。一连视察48小时。测定项目为殒命数、溶氧量（Do）和溶液的PH值转变。
沙蚕试验接纳溶液作育 ，设0、0.5、1、2、3、5ppm6个处置惩罚组 ，每个处置惩罚总溶液50升。为知足沙蚕喜阴的情形条件 ，缸底安排卵石数块 ，沙蚕栖生于卵石下。每缸放养10尾。一连视察72小时。
结 论
（一） 茶皂素的浓度与对虾的毒性的关系
试验效果批注 ，对虾对两种型号茶皂素均有较高的耐受力（见表1）。在用充气一直 氧量的情形下 ，茶皂素浓度高达80ppm时 ，对虾善能生涯 ；在不鼓气时 ，在本试验条件下 ，茶皂素Ⅰ>60ppm、茶皂素Ⅱ>40ppm时对虾严重殒命。从表2的溶氧量剖析效果看 ，这种殒命的缘故原由主要在于溶液缺氧 ，由于在鼓气的情形下水中溶氧量随茶皂素浓度转变很小 ，对虾的殒命也很少 ，而茶皂素Ⅰ为60、80ppm和茶皂素Ⅱ为40、60、80ppm时的溶氧量已从溶液起始的5.5—5.9毫升/升下降到0.3—0.6毫升/升 ，故泛起了对虾的大宗殒命。
表1 两种型号茶皂素对对虾的毒性试验
Table 1 Toxicities of two forms of tea saponin to prawn
（ 单位：殒命数） （Unit：death number）
Concentration （ppm） | 茶皂素Ⅰ Tea Saponin Ⅰ | 茶皂素Ⅱ Tea Saponin Ⅱ | ||
欠亨气 Unaeration | 通气 Aeration | 欠亨气 Unaeration | 通气 Aeration | |
0 5 10 20 40 60 80 | 0 0 0 0 0 10** 10 | 1 2 0 2 1 1 0 | 0 0 0 0 9 10 10 | 1 1 0 2 6* 1 1 |
* 局部气路故障 ，未通气
* * 8死2残
注：48小时视察效果
* Unaeration because of the breakdawn of the aerating system
* * 8 killed and 2 injured
Note：Results of the experiment for 48 hours
表2 差别处置惩罚48小时内的溶氧量转变
Table 2 Change of dissolved oxygen content with different treatments within 48 hours （Unit ：ml/L）
浓度 Concentration （ppm） | 茶皂素Ⅰ Tea Saponin Ⅰ | 茶皂素Ⅱ Tea Saponin Ⅱ | ||
欠亨气 Unaeration | 通气 Aeration | 欠亨气 Unaeration | 通气 Aeration | |
0 5 10 20 40 60 80 | 4.6 4.0 3.2 2.4 1.3 0.6 0.3 | 5.9 5.9 5.9 5.5 5.6 5.8 5.8 | 4.6 4.0 3.0 2.9 0.3 0.3 0.3 | 5.9 5.6 5.7 5.7 — 5.8 5.8 |
为寻找在知足溶氧量条件下 ，茶皂素对对虾的全致死浓度 ，将用药浓度提高到120ppm ，设80、100、120ppm3组处置惩罚 ，经48小时视察 ，80与100ppm的是8活2死 ，120ppm的是5活5死 ，均未抵达全致死。但从生长状态来看 ，100与120ppm2组中仔虾懒动不进食 ，说明此时已有中毒症状。
综上所述 ，对虾对两种型号茶皂素都有一定的抗毒性作用 ，纵然在不鼓气的养殖条件下 ，使用清静浓度亦>10ppm。
（二）茶皂素对沙蚕的毒性试验
沙蚕又叫海蚯蚓 ，栖于潮间带或虾池底部淤泥中 ，是对虾的主要饵料生物。沙蚕在分类上属环节动物 ，但它与鱼类具有相同之处 ，其血液中含有血红细胞。
试验效果批注 ，茶皂素对沙蚕有一定的毒性 ，表3枚举了0、0.5、3、5ppm4个处置惩罚组的视察效果（其中1、2ppm处置惩罚与比照组一样 ，没有异常未列入）起源看出茶皂素对沙蚕的致死浓度大于3ppm。试验中还发明 ，将中毒殒命的沙蚕喂养鱼类及对虾 ，未发明有不良的影响。
表3 茶皂素对沙蚕的毒性试验
Table 3 Toxicity tea saponin to clam worm
（单位：存活数 ，Unit：No. of survival）
浓度(ppm) Concentration | 3h | 21h | 24h | 45h | 72h |
0 0.5 3 5 | 10 10 10 10 | 10 10 10 8 | 10 9* 10 8** | 10 9 9 0*** | 10 9 9 0 |
* 1条殒命为受伤断裂者
* * 严重中毒,体表最先褪色
* * * 呈透明状,部分已解体
* 1 die of injury
* * Seriouly poisoned and faded
* * * Transparent and disintegrated
(三)茶皂素毒性的持效性视察
试验以对茶皂素毒性敏感性较强的纹缟鰕虎鱼为质料 ，接纳放养鱼苗的步伐 ，即投药后距离一准时间投放鱼苗。茶皂素Ⅰ设0.5、1、2、3和5ppm和茶皂素Ⅱ设0.7、0.8、1和5ppm等9种差别浓度处置惩罚 ，一连5天 ，天天放鱼。效果批注 ，两种型号茶皂素在5ppm以内时 ，在投药后的第2天（即24小时左右） ，均保存有毒性 ，但到40小时以后 ，毒性已下降至不再引起鱼中毒殒命 ，即说明茶皂素的鱼毒活性在自然情形中能自行降解 ，这在使用清静行性和情形� ；さ确矫婢哂兄饕庖�。
讨 论
在不鼓气条件下 ，对虾放养48小时后 ，当茶皂素Ⅰ凌驾40ppm、茶皂素Ⅱ大于60ppm、溶氧量降至1.3毫升/升以下时 ，泛起了对虾的严重殒命 ，而在鼓气的条件下殒命则很少 ，说明殒命缘故原由不完全是茶皂素毒性所致 ，而主要是水中缺氧之故。水中溶氧量低于1.3毫升/升时影响对虾生涯的这一效果 ，与日本今井丈夫试验效果一致。
水中溶氧量降低的缘故原由 ，其一是对虾生长中耗氧所致 ，如比照组 48小时后水中溶氧量从5.8毫升/升下降致4.6毫升/升 ；其二溶氧量是随茶皂素浓度的提高而下降的（表2） ，这从两种型号茶皂素100ppm水溶液安排历程中溶氧量的转变测定效果也证实了这一点：比照组经32小时其溶氧量仅从7.1毫升/升 ，而处置惩罚组的溶氧量则从7.3毫升/升下降2.5—3.3毫升/升。但从表2看出 ，茶皂素的这种作用在10ppm以内并不显着 ，虽有对虾养殖 ，经48小时其溶氧量仍能坚持3—3.3毫升/升。因此 ，在举行高浓度试验时 ，应注重坚持水中有一定的溶氧量。
至于茶皂素溶液毒性降解的缘故原由 ，可能与海水的酸碱度有关。从测定纪录来看（表4） ，海水pH值在8.0左右 ，呈微碱性 ，略受茶皂素浓度及安排时间的影响 ，但影响甚微。在碱性条件下 ，茶皂素不很稳固 ，甙元与有机酸之间的酯键断裂剖析成原皂草精醇—A和有机酸 ，毒性也随之消逝。山田等人的试验也证实了这一点。至于解毒的真实缘故原由 ，尚有待进一步研究。这种自行降解的特征 ，对情形� ；な怯欣�。
表4 差别浓度的茶皂素海水溶液安排历程中的pH值转变
Table 4 Changes of the PH values of the sea waters treated with different concentrations of tea saponin during the course of laying up
茶皂素Ⅰ Tea saponin Ⅰ | 茶皂素Ⅱ Tea saponin Ⅱ | ||||||||
浓度（ppm） Concentration | 0h | 24h | 48h | 96h | 浓度（ppm） Concentration | 0h | 24h | 48h | 96h |
0 5 10 20 40 60 80 | 8.05 8.10 8.10 8.12 8.10 8.05 7.90 | 8.40 8.10 7.80 7.70 7.60 7.30 7.80 | 8.20 8.00 7.80 8.00 7.90 7.60 7.60 | 8.00 7.90 7.80 7.90 7.90 7.90 7.80 | 0 5 10 20 40 60 80 | 8.05 8.10 8.10 8.10 8.10 8.05 7.95 | 8.40 8.20 7.40 7.60 7.65 7.80 7.60 | 8.20 8.05 8.00 8.00 7.80 8.00 8.00 | 8.00 7.90 8.00 7.90 7.90 7.60 7.90 |
结 论
1. 对虾对茶皂素具有较高的耐受力 ，在不鼓气的自然条件下 ，使用清静浓度>10ppm ，在有充气包管溶氧量的条件下 ，忍耐浓度可达80ppm。
2. 茶皂素对饵料生物——沙蚕也有毒性作用 ，致死的浓度>3ppm。
3. 茶皂素在微碱性（pH值8左右）海水中会自行降解 ，浓度在5ppm以内 ，药
剂有用时间约2天左右 ，一样平常45小时已无鱼毒活性作用。
参 考 文 献
[1]岑丰：天下对虾产销现状 ，《中国水产》 ，1990（1）：40—41
[2]陈家鑫等译编：《浅海完全养殖》 ，农牧渔业部
